Glikopeptid Sentezi

Glikopeptid Sentezi|Glikosile Peptitler|O-Bağlantılı Glikopeptitler|N-Bağlantılı Glikopeptitler|Bilim-Peptit

Glikobiyoloji araştırması veya glikoprotein taklidi için glikopeptitlere mi ihtiyacınız var? Bilim-PeptidGlikopeptid Sentezi hizmeti, O-bağlantısını, N-bağlantısını ve karmaşık glikanların tanıtımını kapsar. 20 yıllık deneyim, glikosilasyon bölgelerinin hassas kontrolü. Lütfen bizimle iletişime geçmekten çekinmeyin.

Neden glikopeptitler yapıyorsunuz?
Proteinler vücutta nadiren "çıplaktır" - çoğu şeker taşır. Glikosilasyon, protein katlanmasını, stabilitesini, tanınmasını ve sinyalleşmesini etkiler. Bir glikoproteinin işlevini incelemek veya bir glikan epitopuna karşı bir antikor geliştirmek istiyorsanız, çıplak bir peptite sahip olmak yeterli değildir, glikanları eklemeniz gerekir.

 

Glikopeptid Sentezinin zorluğu, glikan zincirinin karmaşık yapısında ve peptite bağlandığında glikan zincirinin bütünlüğünün ve doğru bölgenin sağlanması ihtiyacında yatmaktadır; O-konjugasyon iyidir, ancak N-konjuge glikan zincirleri çok daha uzundur, bu da sentez zorluğunu doğrudan iki katına çıkarır. Bu çukurlara daha önce de girdik ve bunların etrafından nasıl geçeceğimizi biliyoruz.

1. Glikosilasyon Türü: Hem O- hem de N-Bağlantıları Yapılır

Araştırma hedeflerinize bağlı olarak hangi glikosilasyon stratejisinin en uygun olduğunu araştıracağız. Glikopeptid Sentezindeki ilk adım doğru şeker zincirini ve bağlantısını seçmektir.

2. Şeker zinciri uzunluğu: monosakkaritlerden karmaşık şeker zincirlerine kadar
Monosakarit modifikasyonu: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal, vb., en basit ve en başarılı.
Disakaritler/trisakaritler: örneğin laktoz, kitosan, glikosil donörleri tarafından iyi korunmaya ihtiyaç duyar.
Karmaşık şeker zincirleri: yüksek mannoz türü, karmaşık N-glikanlar, dokuza kadar şeker.
Sialilasyon: Sialik asit ile terminal bağlantısı, doğal glikoproteinlerin tanıma bölgesini taklit eder.

3. Nokta kontrolü: kesinlik, tahmin yok
Glikozilasyonun en büyük korkusu nedir? Yanlış bölgede glikokonjugasyon veya bir bölge bağlıyken diğer bölge bağlı değil. Ortogonal koruma stratejimizle, belirli bir bölgeye glikosilasyon uygulayabilir ve diğer bölgeleri olduğu gibi bırakabiliriz. Birden fazla bölgeyi glikozile etmeniz mi gerekiyor? Bunları tek tek tanıtıp, net bir şekilde kontrol edebiliyoruz.

4. Saflık: Deneysel Gereksinimlere Bağlıdır

Her bir glikopeptide, glikan zincirinin bütünlüğünü ve doğru bölgeyi destekleyen verilerle birlikte HPLC ve MS raporları eşlik eder.

5. Glikopeptitlerdeki diğer değişiklikler
Glikopeptitler kendi başlarına yeterince karmaşıktır ancak bazı deneyler başka bir şeye ihtiyaç duyar:
Floresan etiketleme: FITC, TAMRA, glikopeptid hedefini izleme.
Biyotin:Aşağı-aşağı çekin veya test edin.
Fosforilasyon: Karışmayı incelemek için glikosilasyon ve fosforilasyonun eş zamanlı simülasyonu.
İzotop etiketlemesi: NMR veya kütle spektrometresi ölçümü için.

1. Glikokimya + peptit sentezi, iki- yönlü yaklaşım
Glikopeptid Sentezi zordur çünkü iki alanı ({0}} glikokimya ve peptid sentezini geçer. Şeker yapan peptidi bilmeyebilir, peptid yapan da şekeri bilmeyebilir. Her iki tarafta da insanlarımız var, glikozil donörünü kendimiz hazırlıyoruz, glikozilasyon koşullarını kendimiz optimize ediyoruz, dış kaynak kullanmamıza gerek yok ve sorunları kendimiz ayarlayabiliriz.

2. Esnek koruma stratejileri ve şeker zincirinin bütünlüğü
Glikozilasyon sırasında şeker zincirinin kendisinin korunması gerekir, aksi takdirde reaksiyon koşulları şekeri devre dışı bırakacaktır. Şeker zincirini peptit sentezi koşulları altında stabilize edebilen ve son adımda koruması kaldırıldığında şekeri bozulmadan bırakabilen çeşitli koruma grubu kombinasyonlarımız var.

3. Site kontrolü: istediğiniz yere bağlanın
Tek Bölgeli Glikosilasyon: Şeker belirli bir yere verilir ve başka yerde çıplak bırakılır.
Çok-bölgeli glikosilasyon: farklı alanlar, birbirine müdahale etmeden tek tek eklenebilen farklı şeker zincirleri taşıyabilir.
Seçici glikosilasyon: birden fazla Ser/Thr vardır, bunlardan yalnızca biri glikosile edilir -, olasılık ile değil, koruma stratejisi ile elde edilir.

4. QC: Şeker zinciri sağlam mı? Siteler doğru mu?
Glikopeptitler kalite kontrolünde normal peptitlere göre daha zahmetlidir::

MS moleküler ağırlığı: Şekerin bağlı olup olmadığını ona bakarak anlayabilirsiniz.
Siteyi görmek için MS/MS (isteğe bağlı): Şekerin hangi amino asitin bağlı olduğunu görmek için peptidi parçalayın.
Saflığı görmek için HPLC: Ayrıca şeker giderme safsızlıklarını da arayın.
Şeker bileşimi analizi: Gerektiğinde şeker zinciri bileşiminin ve bağlantılarının ölçülmesi.
Her bir glikopeptidin verileri size verilmektedir, dolayısıyla tahmin yapmanıza gerek yoktur.

5. Miligramdan yüz miligrama kadar, sonuna kadar
Tarama aşaması için miligram, doğrulama aşaması için on miligram, yapısal çalışma için yüz miligram - hepsini alabiliriz. Aynı proje, aynı muadili, yeniden-uyumlaştırmaya gerek yok.

Yapısal biyoloji NMR/glikoprotein homojen şeker zincirlerinin kristal yapısı, izotopik etiketleme

• Teslimat: Nitrojenle korunan liyofilize toz, santrifüj tüpleri veya şişeler.
• Ekteki belgeler:COA (HPLC profili + MS profili), MS/MS (glikozilasyon bölgelerinin onayı).
• İsteğe bağlı testler: peptid içeriği, endotoksin, nem, şeker bileşimi analizi.
• Özelleştirilmiş Paketleme: ihtiyaçlarınıza göre porsiyonlama ve işaretleme.
• Şeker zincirinin eksiksiz olduğundan ve bölgelerin doğru olduğundan emin olmak için her Glikopeptid Sentezi ürünü gönderilmeden önce iki kez-kontrol edilir.

İster monosakaritler ile değiştirilmiş basit glikopeptitler, ister karmaşık N-bağlı glikanlar isteyin, konuşabiliriz. En azından Science-Peptide'den Glikopeptid Sentezi yapmasını istediğinizde her iki tarafta da birini aramanıza gerek yok.

Bana şunu söylemeni istiyorum:
peptit dizileri
Glikosilasyon bölgeleri ve şeker zinciri yapıları (referanslar en iyisidir)
Ne kadar (miligram)
saflık gereksinimleri

Ne zaman istiyorsun?
Size 24 saat içinde bir fizibilite değerlendirmesi ve teklif verin.